寶晶科技：專業(yè)的儀器產(chǎn)品銷售、服務(wù)提供商
操作規(guī)程
您現(xiàn)在的位置：首頁 > 操作規(guī)程
| 固相萃取（SPE）技術(shù)介紹 |
| 發(fā)布者：鄭州寶晶電子科技有限公司 發(fā)布時間：2024/9/3 閱讀：2894次 |
|
一. 固相萃取概念及基本原理：
固相萃取（Solid Phase Extraction,簡稱SPE）是從八十年代中期開始發(fā)展起來的一項樣品前處理技術(shù)。由液固萃取和液相色譜技術(shù)相結(jié)合發(fā)展而來。主要通過固相填料對樣品組分的選擇性吸附及解吸過程，實(shí)現(xiàn)對樣品的分離，純化和富集。主要目的在于降低樣品基質(zhì)干擾，提高檢測靈敏度。
固相萃取的基本原理和方法：
SPE技術(shù)基于液-固相色譜理論，采用選擇性吸附、選擇性洗脫的方式對樣品進(jìn)行富集、分離、純化，是一種包括液相和固相的物理萃取過程；也可以將其近似的看作一種簡單的色譜過程。
固相萃取（SPE）是利用選擇性吸附與選擇性洗脫的液相色譜法分離原理。較常用的方法是使液體樣品通過一吸附劑，保留其中被測物質(zhì)，再選用適當(dāng)強(qiáng)度溶劑沖去雜質(zhì)，然后用少量良溶劑洗脫被測物質(zhì)，從而達(dá)到快速分離凈化與濃縮的目的。也可選擇性吸附干擾雜質(zhì)，而讓被測物質(zhì)流出；或同時吸附雜質(zhì)和被測物質(zhì)，再使用合適的溶劑選擇性洗脫被測物質(zhì)。
二. 固相萃取方法的優(yōu)點(diǎn)
相對于傳統(tǒng)的液液萃取法和蛋白沉淀法，固相萃取具有無可比擬的優(yōu)勢：
凈化方法：LLE（液液萃取）
優(yōu) 點(diǎn)：無需特殊裝置和材料
缺 點(diǎn)：
1.操作繁瑣，費(fèi)時
2.需要耗費(fèi)大量的有機(jī)溶劑，導(dǎo)致高成本和對環(huán)境的污染
3.難以從水中提取高水溶性物質(zhì)
凈化方法：PPT（蛋白沉淀）
優(yōu) 點(diǎn)：操作簡單，無需特殊裝置
缺 點(diǎn)：
1.非特異性的沉淀反應(yīng)可能使微量的分析物隨著基質(zhì)蛋白質(zhì)共同沉淀而損失
2.凈化效果較弱，檢測靈敏度和可靠性低
凈化方法：SPE（固相萃取）
優(yōu) 點(diǎn)：
1.集樣品富集及凈化與一身，提高檢測靈敏度的較好方法
2.比液液萃取更快，節(jié)省溶劑
3.可自動化批量處理
4.重現(xiàn)性好
缺 點(diǎn)：
1.使用進(jìn)口固相萃取小柱的成本較高
2.需要專業(yè)人員協(xié)助方法開發(fā)
三.固相萃取裝置及基本操作步驟
1.固相萃取柱
（1）SPE小柱
關(guān)于固相萃取小柱：
a.常見的固相萃取柱分為三部分：醫(yī)用聚丙烯柱管，多孔聚丙烯篩板（20μm）和填料（多為40-60μm，80-100μm）
b.常見規(guī)格：100mg/1ml,200mg/3ml,500mg/3ml,1g/6ml等。以100mg/1ml為例，其中100 mg
為填料的質(zhì)量，1ml是空柱管的體積。
c.一次性使用：為避免交叉污染，保證檢測可靠性，SPE小柱通常是一次性使用的。
2）96孔板
96孔板是高通量的SPE產(chǎn)品，每孔含少量吸附劑（10-100mg），樣品載量約2ml/孔主要用于生物，醫(yī)藥等行業(yè)小量的多樣品的凈化處理。且多與自動化的樣品處理處理裝置連用（如Tomtec液體處理工作站）。其基本原理和使用方法與SPE柱相似。
2.固相萃取裝置 （YGC-8數(shù)控固相萃取儀 YGC-6圓形固相萃取儀 YGC-6A方缸一體式固相萃取儀 YGC-6B固相萃取儀 YGC-8自動固相萃取儀）
（1）真空SPE裝置（SPE Vacuum Manifolds）組成：玻璃缸，真空壓力表，真空泵，真空緩沖瓶，收集管架，小柱連接頭，大體積取樣器，12位或24位防交叉污染裝置。
標(biāo)配StopCock閥，精確控制流速
試管架高度可調(diào)，滿足不同體積需要
壓力表放空閥側(cè)面設(shè)計，使用方便
設(shè)計緊湊、經(jīng)久耐用、性價比高
2）自動化固相萃取裝置
a.醫(yī)藥/環(huán)保/刑事鑒定中自動樣品前處理
b.自動進(jìn)行固相萃取/可多組份收集
c.無人為影響，無乳化，節(jié)省溶劑
d.高回收率，高重現(xiàn)性，高效率適用于各種商品萃取柱
e.自動記錄資料，便于GLP管理
f.特別適合于HPLC或LC/MS的樣品處理
g.價格較高
3.基本操作步驟
針對填料保留機(jī)理的不同（填料保留目標(biāo)化合物或保留雜質(zhì)），操作稍有不同。
1）填料保留目標(biāo)化合物
固相萃取操作一般有四步：
活化——除去柱子內(nèi)的雜質(zhì)并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境。
上樣——將樣品用一定的溶劑溶解，轉(zhuǎn)移入柱并使組分保留在柱上。
淋洗——較大程度除去干擾物。
洗脫——用小體積的溶劑將被測物質(zhì)洗脫下來并收集。
2）填料保留雜質(zhì)
固相萃取操作一般有三步：
活化——除去柱子內(nèi)的雜質(zhì)并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境。
上樣——將樣品轉(zhuǎn)移入柱，此時大部分目標(biāo)化合物會隨樣品基液流出，雜質(zhì)被保留在柱上。故此步驟要開始收集。
洗脫——用小體積的溶劑將組分淋洗下來并收集。合并收集液。
此種情況多用于食品或農(nóng)殘分析中去除色素。
| |
